细胞实验的成功，往往从 “第一公里” 开始 —— 常温细胞的收货处理。看似简单的开箱操作，实则藏着影响后续实验结果的关键细节。今天，我们就来拆解常温细胞收货的全流程，从准备工作到应急处理，让你的细胞从抵达实验室的那一刻就得到最妥帖的照顾。​

一、收货前：做好 “战前准备”​​

常温细胞（如 T 细胞、干细胞等）在运输过程中处于特殊生理状态，收货前的准备工作直接决定细胞活性的保留程度。建议提前 1 小时完成以下准备：

1. 环境核查​

确认生物安全柜已消毒并运行 30 分钟以上，紫外灯消毒时间不少于 20 分钟。同时检查培养箱温度（37℃±0.5℃）、CO₂浓度（5%±0.1%）是否稳定，备用培养瓶需提前加入适量完全培养基，在培养箱内预热至 37℃。​

2. 耗材清点​

准备无菌 15ml 离心管、移液枪（1ml/5ml）、枪头、75% 酒精喷壶、细胞计数板等。若接收的是冻存管运输的细胞，需额外准备 37℃恒温水浴锅，水位控制在冻存管高度的 2/3 处。​

3. 应急预案​

提前熟悉细胞株的特性说明书（如是否需要特殊添加剂、传代比例等），准备好应急培养基（如无血清培养基用于意外污染时的清洗）。​

二、收货时：3 步完成 “开箱检查”​

常温细胞运输通常采用泡沫箱 + 冰袋（维持 15-25℃）的包装，收货时需按以下步骤操作：​

1. 外观检查​

观察包装是否有破损、渗漏，冰袋是否完全融化（若融化可能导致运输温度超标）。记录开箱时间、环境温度，拍照留存包装状态（便于后续追溯问题）。

2. 信息核对​

对照发货单检查细胞株名称、编号、代次是否一致，是否附带质检报告（包括无菌检测、支原体检测结果）。若为冻存细胞，需确认冻存管是否有裂纹、标签是否清晰。​

3. 细胞状态初判​

对于贴壁细胞，观察培养瓶中细胞是否脱落、培养基是否浑浊；悬浮细胞需查看是否有沉淀、絮状物。若发现异常，立即拍摄清晰照片联系供应商，同时做好记录。​

三、收货后：分场景处理指南​

根据细胞类型和运输形式，收货后的处理方式有所不同，以下是常见场景的操作规范：​

1. 贴壁细胞（培养瓶运输）​

用 75% 酒精擦拭培养瓶表面，静置 30 秒后移入生物安全柜。​

缓慢倒出旧培养基（保留 5ml 备用，若后续细胞状态异常可用于检测），加入预热的新鲜培养基（覆盖细胞层即可）。​

置于培养箱中静置 2-4 小时，待细胞完全贴壁后，更换全部培养基，开始常规培养。​

2. 悬浮细胞（离心管运输）​

酒精消毒离心管后放入安全柜，1000rpm 离心 5 分钟，弃上清。​

用 1ml 新鲜培养基重悬细胞，取少量进行计数（推荐使用台盼蓝染色检测活率，活率应≥85%）。​

按合适密度接种到培养瓶中，补充培养基至推荐体积，轻轻混匀后放入培养箱。​

4. 冻存细胞（常温复苏运输）​

图片来源于百度

快速将冻存管放入 37℃水浴锅，轻轻摇晃至剩余少量冰晶时取出（避免完全融化后温度骤升）。​

酒精消毒管壁，移入安全柜，将细胞悬液转移至含 5ml 培养基的离心管，1200rpm 离心 5 分钟。​

弃上清后用培养基重悬，接种至培养瓶，48 小时内避免换液，让细胞逐步适应环境。​

四、关键注意事项：这些 “细节” 决定成败​

1. 时间控制​

从开箱到完成接种的总时间应控制在 30 分钟内，避免细胞长时间暴露在室温环境中。​

2. 无菌操作​

所有步骤需在生物安全柜内进行，移液时枪头避免接触瓶口边缘，每操作一步都要对瓶口进行火焰消毒。​

3. 状态监测​

接种后 24 小时内密切观察细胞状态，贴壁细胞需确认是否伸展良好，悬浮细胞是否均匀分布。若发现细胞皱缩、聚团，及时排查培养基配方或温度问题​

4. 记录存档​

建立 “细胞收货档案”，记录细胞来源、接收时间、初始状态、操作人等信息，便于实验追溯。​

五、常见问题及解决方案​

问题现象	可能原因	解决办法
细胞活率低	运输温度波动	提高接种密度，加入 10% 血清促进恢复
培养基浑浊	污染风险	立即离心换液，添加青霉素 – 链霉素双抗
贴壁细胞脱落	运输震荡	收集脱落细胞离心后重新接种，降低换液频率

 

常温细胞的收货处理，考验的是实验人员的细心与规范。从开箱前的准备到接种后的监测，每一个环节都可能影响细胞的后续表现。记住：对待细胞就像对待精密仪器，耐心和严谨永远是第一位的。​