裸鼠皮下种瘤的注意事项
裸鼠皮下种瘤的注意事项如下:
一、实验准备阶段
- 细胞准备:
- 确保所种的肿瘤细胞状态良好,处于对数生长期,活力高。
- 对细胞进行计数,以便准确掌握接种的细胞数量。
- 裸鼠选择:
- 选用健康、无特定病原体(SPF)级别的裸鼠,年龄和体重应尽量相近。
- 检查裸鼠的皮肤完整性,避免有外伤或感染的裸鼠用于实验。
- 实验器材消毒:
- 接种用的注射器、针头、镊子等器材需严格消毒,可采用高压蒸汽灭菌等方法。
二、接种过程中
- 环境要求:
- 在无菌环境下进行操作,如超净工作台。
- 操作过程中动作要轻柔,避免对裸鼠造成不必要的损伤。
- 接种部位选择:
- 通常选择裸鼠的侧腹部或背部皮下进行接种,避免在靠近重要器官或血管的部位接种。
- 确保接种部位准确,可使用记号笔标记。
- 接种方法:
- 用注射器吸取适量的肿瘤细胞悬液,缓慢注射到皮下,避免注入肌肉层或腹腔内。
- 注射后,轻轻按压注射部位,防止细胞悬液溢出。
三、接种后观察
- 饲养环境:
- 提供适宜的饲养环境,温度、湿度稳定,保持通风良好。
- 定期更换垫料,保持笼具清洁。
- 观察指标:
- 密切观察裸鼠的一般状态,如饮食、活动、体重等。
- 定期测量肿瘤的大小,可使用游标卡尺等工具,记录肿瘤的长径和短径,计算肿瘤体积。
- 注意观察裸鼠是否有异常症状,如呼吸困难、消瘦、脱毛等,及时处理异常情况。
- 伦理要求:
- 严格遵守动物实验伦理规范,在实验过程中尽量减少裸鼠的痛苦。
- 实验结束后,对裸鼠进行妥善处理。