一、准备：工具与材料的“严选”

1. 核心器材

– 载玻片/盖玻片：选择无划痕、洁净的玻璃片（可用纱布擦拭至透光无污渍），避免油污影响观察。

– 样本材料：根据观察目标选择薄而透明的材料（如洋葱内表皮、口腔上皮细胞、藓类小叶），厚度不超过2层细胞（过厚会导致光线无法穿透）。

– 辅助试剂：

– 植物细胞（如洋葱）：滴加清水（维持细胞形态，防止失水皱缩）；

– 动物细胞（如口腔上皮）：滴加生理盐水（0.9%氯化钠溶液，避免细胞吸水涨破）；

– 染色剂（可选）：碘液（染细胞核）、稀墨汁（染草履虫），需根据样本特性选择。

– 工具：镊子（撕取材料）、滴管（滴加液体，需专用，避免交叉污染）、吸水纸（引流染色剂）、解剖针（展平材料）。

 

 

二、核心步骤：从“取材”到“盖片”的细节把控

1. 擦片：杜绝“隐形杂质”

– 用洁净纱布（或镜头纸）分别擦拭载玻片和盖玻片，一手固定玻片，另一手沿同一方向擦拭，避免来回摩擦产生划痕。

– 避坑点：若玻片残留指纹或油污，会导致视野出现不规则亮斑，需用酒精棉片二次清洁。

 

2. 滴水：“量”与“液”的精准控制

– 在载玻片中央滴1-2滴液体（清水/生理盐水），液滴直径约5mm（绿豆大小），过多易溢出污染显微镜，过少会导致样本干涸。

– 特殊样本处理：若观察单细胞生物（如草履虫），可在液滴中加少量棉花纤维限制其运动；观察血液涂片时无需滴水，直接推片即可。

 

3. 取材与展平：避免“重叠”与“损伤”

– 植物样本（如洋葱内表皮）：用镊子从鳞片叶内侧撕取透明薄膜（仅取单层细胞，带叶肉会导致重叠），放入水滴中，用解剖针轻轻展平（呈扇形或圆形，无褶皱）。

– 动物样本（如口腔上皮）：用消毒牙签在口腔内侧壁轻刮2-3次，将刮取物均匀涂抹在生理盐水中（避免用力过猛导致细胞破裂）。

– 避坑点：材料未展平会导致细胞堆叠，视野中出现“多层模糊”；若样本过大，可先用刀片切取合适大小（如黑藻小叶取0.5cm²即可）。

 

4. 盖片：“45°角慢放”防气泡

– 用镊子夹起盖玻片一侧，使另一侧边缘先接触液滴（形成“接触角”），然后缓慢倾斜放下（速度越慢，气泡越少），让盖玻片自然覆盖样本。

– 气泡处理：若出现少量气泡，可轻压盖玻片边缘，或用解剖针轻挑盖玻片排出；若气泡过多，需重新制作（气泡在显微镜下呈黑色边缘、中央发亮的圆圈，易与细胞混淆）。

 

 

三、染色：让结构“显形”的关键（可选）

– 适用场景：观察无色透明结构（如细胞核、线粒体）时需染色，有色样本（如叶绿体、番茄果肉细胞）可省略。

– 操作步骤：

1. 在盖玻片一侧滴加1-2滴染色剂（如碘液），等待10-15秒；
2. 用吸水纸在盖玻片对侧引流（吸引染液扩散至整个样本），避免直接滴加在盖玻片上导致染色不均。

– 避坑点：染色时间过长（如碘液超过30秒）会导致细胞结构被破坏，视野呈深褐色；染色后需用吸水纸吸去多余染液，防止污染镜台。

 

 

四、最终检查：装片质量“三看”

1. 肉眼看：盖玻片无偏移，液滴未溢出，样本位于中央区域；
2. 低倍镜看：视野明亮，无杂质、气泡，细胞分散均匀（无重叠、无褶皱）；
3. 高倍镜看：细胞形态完整（如植物细胞有清晰细胞壁，动物细胞无细胞壁），目标结构可辨（如叶绿体呈绿色椭球形）。

 

 

五、特殊样本处理技巧

– 微小生物（如衣藻、水螅）：直接用滴管取少量培养液滴在载玻片上，加盖盖玻片（无需展平）；

– 柔嫩组织（如黄瓜表层果肉）：用刀片刮取少量果肉细胞，均匀涂抹在清水中，避免损伤细胞；

– 需要保持活性的样本（如观察叶绿体流动）：全程操作迅速，避免样本长时间暴露在空气中，装片制作后立即观察。