细胞污染的表现
一、细胞污染后在宏观上主要有以下表现：
- 培养基变化
颜色改变：含有酚红指示剂的培养基常被用于细胞培养。正常情况下，培养基呈淡红色。当被细菌污染时，由于细菌代谢产生酸性物质，会使培养基 pH 值下降，颜色变为黄色。而真菌感染时，培养基颜色变化通常不明显，但也可能因真菌的代谢产物影响而发生改变。
浑浊度增加：污染后，微生物在培养基中大量繁殖，会使培养基变得浑浊。细菌污染时，浑浊现象通常较为明显，肉眼可观察到培养基中有微小颗粒或云雾状悬浮物。真菌污染则可能在培养基表面形成白色或其他颜色的菌斑，使培养基整体看起来不透明。
- 细胞生长状态异常
生长缓慢或停滞：受到污染的细胞，其生长速度会明显减慢，甚至停止生长。这是因为微生物与细胞争夺营养物质，同时微生物产生的毒素会抑制细胞的代谢和增殖。例如，支原体污染会干扰细胞的蛋白质合成和代谢途径，导致细胞生长缓慢，细胞周期异常。
细胞形态改变：正常细胞具有特定的形态和结构，如贴壁细胞呈扁平状，有规则的边界。污染后，细胞形态可能会发生改变，出现细胞肿胀、变形、破裂，或者细胞之间的连接变得松散，不再形成紧密的单层细胞。例如，细菌产生的毒素可能破坏细胞膜的完整性，使细胞失去正常形态。
细胞死亡：严重污染时，细胞会大量死亡，培养瓶或培养皿中可观察到细胞碎片增多。细胞死亡率升高，导致细胞数量逐渐减少，无法维持正常的细胞培养密度。
如果细胞培养过程中出现上述宏观表现，应及时进行检测和鉴定，确定污染类型，并采取相应的措施，如丢弃污染的细胞、对实验器材进行彻底消毒等，以防止污染扩散，保证细胞培养实验的顺利进行。
二、细胞污染在微观层面主要有以下表现：
- 细菌污染
显微镜下形态：在相差显微镜下，细菌呈现为大小不一的杆状、球状或螺旋状等形态，通常比细胞小很多。它们会在细胞周围或细胞间隙中快速游动或布朗运动，有些细菌还会聚集形成团块。
细胞超微结构改变：细菌污染可能导致细胞超微结构受损。例如，细菌产生的毒素可能破坏细胞膜的完整性，使细胞膜出现破损、皱缩等现象。在电子显微镜下，可以观察到细胞内的细胞器肿胀、线粒体嵴模糊、内质网扩张等，这些变化会影响细胞的正常功能，导致细胞代谢紊乱。
- 真菌污染
显微镜下形态：真菌污染在显微镜下可见菌丝和孢子。菌丝通常呈细长的管状结构，有分支，交织成网状。孢子则为圆形或椭圆形，可单个存在或聚集在一起。不同种类的真菌，其菌丝和孢子的形态、大小和颜色有所不同，如白色念珠菌的孢子呈圆形或卵圆形，有芽生现象，菌丝较短；黑曲霉的孢子呈黑色，菌丝有分隔且分支较多。
细胞超微结构改变：真菌污染时，菌丝可能会缠绕在细胞表面，甚至侵入细胞内部。细胞内可见真菌的细胞器，如线粒体、内质网等与细胞自身的细胞器相互混杂。同时，细胞的溶酶体数量可能增多，这是细胞对真菌入侵的一种应激反应，但过多的溶酶体释放会导致细胞自溶，影响细胞的存活和功能。
- 支原体污染
显微镜下形态：支原体没有细胞壁，形态多样，常见的有球形、杆状、丝状等。由于支原体体积较小，普通光学显微镜下难以观察到，需使用相差显微镜或荧光显微镜，并配合特殊的染色方法才能看到。在荧光显微镜下，用 DAPI 染色后，支原体呈蓝色荧光小点，分布在细胞表面或细胞之间。
细胞超微结构改变：支原体污染会影响细胞的超微结构。它会吸附在细胞表面，通过与细胞膜的相互作用，导致细胞膜的结构和功能发生改变，使细胞膜表面的微绒毛减少或消失。细胞内的核糖体数量可能减少，影响蛋白质的合成。此外，支原体还可能干扰细胞的信号转导通路，导致细胞的代谢和生理功能异常。
- 病毒污染
显微镜下形态：病毒个体极其微小，普通光学显微镜无法观察到，需要借助电子显微镜才能看到其形态。病毒具有多种形态，如球形（如腺病毒）、杆状（如烟草花叶病毒）、蝌蚪状（如噬菌体）等。在电子显微镜下，可见病毒由核酸和蛋白质外壳组成，有些病毒还具有包膜结构。
细胞超微结构改变：病毒感染细胞后，会在细胞内进行复制和增殖，导致细胞超微结构发生一系列变化。例如，病毒可能在细胞核或细胞质内形成包涵体，这是病毒复制和装配的场所，在电子显微镜下呈现为电子密度较高的区域。同时，细胞的内质网、高尔基体等细胞器会参与病毒的合成和加工过程，导致这些细胞器的形态和功能发生改变，如内质网扩张、高尔基体肿胀等。随着病毒的大量增殖，细胞最终会破裂，释放出子代病毒，继续感染周围的细胞。